背景:
支原體(Mycoplasma)是對支原體科、無膽甾原體科和螺原體科的原核微生物總稱,是已知可以自由生活的最小生物,沒有細(xì)胞壁,形狀多樣可變,直徑一般是 0.1~0.3μm,基因組 A-T 含量高,對常見的抗生素不敏感,對熱敏感。目前已從污水、植物、動物、禽類、昆蟲、人、溫泉或其他高溫環(huán)境中發(fā)現(xiàn) 200 種左右支原體。
細(xì)胞如果受到支原體污染,細(xì)胞生長速度變慢,細(xì)胞產(chǎn)生病變或形態(tài)改變。連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞污染的概率大約 15~35%,主要來源于 20 多種支原體,包括口腔支原體(M.orale)、肺炎支原體(M. pneumoniae)、發(fā)酵支原體(M. fermentans)、精氨酸支原體(M. arginini)、萊氏無膽甾原體(A. laidlawii)和豬鼻支原體(M. hyorhinis)。
人員操作、污染的細(xì)胞、原輔料(血清、胰酶、培養(yǎng)基),實驗環(huán)境污染(生物安全柜、細(xì)胞間,培養(yǎng)箱)、實驗儀器(水浴鍋、液氮罐)、實驗耗材(培養(yǎng)皿、方瓶、細(xì)胞工廠)都可能是污染源。污染了的細(xì)胞一方面對生產(chǎn)帶來巨大影響,另外如果細(xì)胞產(chǎn)品、蛋白產(chǎn)品、病毒類產(chǎn)品受到支原體污染,最終會給患者帶來潛在的健康風(fēng)險。因此,監(jiān)管部門要求企業(yè)對細(xì)胞庫,檢定用細(xì)胞和產(chǎn)品進(jìn)行支原體檢測,從源頭上進(jìn)行控制,盡早發(fā)現(xiàn),確保放行產(chǎn)品不含支原體。對此,全球各國藥物監(jiān)管部門也發(fā)布了支原體檢測相關(guān)指南,檢測方法主要包括熒光染色法、培養(yǎng)法、核酸擴(kuò)增法和生化檢測方法。
概述:
Rhinogen? MycoAlarm? 支原體檢測試劑盒采用了生化方法進(jìn)行支原體檢測。利用支原體特有的 ATP 合成相關(guān)酶,在底物存在的情況下可以轉(zhuǎn)化 ADP 為 ATP。存活的支原體溶解后,釋放大量的酶與底物反應(yīng),促進(jìn) ADP 轉(zhuǎn)化為 ATP,提供一種快速、靈敏的樣品檢測方法。通過對比加入底物后樣品 ATP 含量的變化檢測,即可通過前后含量變化比例來確定有無支原體。反應(yīng)如下:
試劑包裝:
Rhinogen? MycoAlarm? 支原體檢測試劑盒包裝規(guī)格如下:
RA-MT01 規(guī)格:
試劑組分 |
貨號 |
規(guī)格 |
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25T |
50T |
100T |
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MycoAlarm? 檢測試劑 (凍干粉) |
RA-MT01A |
1×1.5ml |
1×3ml |
2×3ml |
MycoAlarm? 底物試劑 (凍干粉) |
RA-MT01B |
1×1.5ml |
1×3ml |
2×3ml |
MycoAlarm? 測定緩沖液 |
RA-MT01C | 1×4ml | 1×8ml | 2×8ml |
RA-MT02 規(guī)格:
試劑組分 |
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貨號 |
規(guī)格 |
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MycoAlarm? 陽性對照 (凍干粉) |
RA-MT02A |
1×1.2 ml |
MycoAlarm? 陽性對照稀釋液 |
RA-MT02B |
2×1.5 ml |
產(chǎn)品特性:
保存條件:
冰袋運(yùn)輸,收貨后:
1)將RA-MT01試劑盒2~8℃存儲,請勿凍存。試劑盒取出恢復(fù)至室溫(20-22℃最佳), 復(fù)溶后取所需體積備用;
2)將RA-MT02試劑盒置于-70℃長期存儲或-20℃短期存儲,建議未使用部分試劑按用 量分裝避免試劑反復(fù)凍融,試劑使用前請恢復(fù)室溫(20-22℃最佳);
3)試劑復(fù)溶后置于-70℃保存,建議3個月內(nèi)使用完。