背景：

       蛋白內(nèi)切酶Glu-C(又稱V8蛋白酶、谷氨酰胺內(nèi)切酶、天冬酰胺內(nèi)切酶、金黃色葡萄菌V8蛋白酶)屬于絲氨酸蛋白酶家族，能特異水解谷氨酸(Glu)或天冬氨酸(Asp)殘基羧基端肽鍵。其特異性受緩沖液組分直接影響，在pH7.8的NH4HCO3和pH4.0的CH3COONH4緩沖液中識(shí)別并切割Glu羧基端肽鍵，在pH7.8的磷酸鹽緩沖液中識(shí)別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵，且對Glu的水解速率高于Asp。

       Rhinogen^? Glu-C (Sequencing Grade)是利用重組大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)并經(jīng)過多步層析純化得到的重組蛋白酶，分子量大小約為24kD，可以單獨(dú)使用或與其它蛋白酶搭配用于蛋白質(zhì)酶切測序、肽圖譜分析和肽指紋圖譜分析。其在pH4.0-9.0之間均有活性，最適pH為8.0-8.5。V8蛋白酶的抑制劑有二異丙基氟磷酸（DFP）、α2-巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺?；?L-賴氨酸氯甲基酮（TLCK）。

包裝規(guī)格：

       Rhinogen^? Trypsin (Sequencing Grade)包裝規(guī)格如下：

       QIP-005是以凍干粉形式提供。

產(chǎn)品來源：

       Rhinogen^? Glu-C (Sequencing Grade)是利用重組大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)生產(chǎn)并經(jīng)過多步層析純化得到的重組蛋白酶，分子量大小約為24kDa。

產(chǎn)品質(zhì)量：

       SDS-PAGE分析，純度≥95%；沒有檢測到污染的蛋白酶活性。

產(chǎn)品特性：

       在pH4.0-9.0之間均有活性，最適pH為8.0-8.5。

儲(chǔ)存條件：

       1.采用冰袋運(yùn)輸，收到產(chǎn)品后請立即將酶置于-20℃，密封防潮。

       2.使用水或50mM pH8.0Tris-HCl溶解成0.5mg/ml后，存于-20℃以下，6個(gè)月穩(wěn)定；存于2-8℃（無菌），2個(gè)月穩(wěn)定；25℃或37℃條件下12h，活性可維持85%以上；避免室溫下長時(shí)間放置，建議分裝儲(chǔ)存，避免多次反復(fù)凍融。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

       Rhinogen^? Glu-C (Sequencing Grade)是一種高度純化和非常穩(wěn)定的重組蛋白酶，具有穩(wěn)定性高、比活性高等特點(diǎn)。適用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究中肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分析。

       1. 高純度：沒有污染蛋白酶，純度≥95％；

       2. 高穩(wěn)定性：每批產(chǎn)品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制，以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品批間穩(wěn)定性；

       3. 無動(dòng)物源性：重組生產(chǎn)，無外源性的病毒污染，生產(chǎn)過程不使用任任何動(dòng)物源原料。

應(yīng)用：

       1. 肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分析；

       2. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究。

使用建議：

       1、試劑準(zhǔn)備：

       1）使用水或50mM pH8.0 Tris-HCl溶解干粉，得到濃度為0.5mg/ml-1mg/ml的Glu-C溶液。溶解后建議根據(jù)單次使用量進(jìn)行分裝，最大限度避免污染或自切。

       2、推薦使用方法：

       1） 目的蛋白溶解：用酶切緩沖液（如采用25-50mM pH7.8 NH₄HCO₃緩沖液）溶解目的蛋白，若目的蛋白溶解度低，可以考慮對目的蛋白進(jìn)行變性處理（如添加尿素、SDS、DTT或加熱）。尿素和SDS對Glu-C蛋白酶的影響見下表：

       2）目的蛋白酶切：Glu-C蛋白酶的使用量推薦為，Glu-C蛋白酶：目的蛋白=1:20-1:100(w/w) ，最適pH為8.0-8.5，25℃或37℃酶切2-18hr。

       注意：對于不同的蛋白樣品，需要實(shí)驗(yàn)摸索最適的酶濃度及反應(yīng)時(shí)間。

操作說明：

       本產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人或動(dòng)物的診斷及治療用途。