背景:
支原體(Mycoplasma)是對支原體科、無膽甾原體科和螺原體科的原核微生物總稱,是已知可以自由生活的最小生物,沒有細胞壁,形狀多樣可變,直徑一般是 0.1~0.3μm,基因組A-T 含量高,對常見的抗生素不敏感,對熱敏感。目前已從污水、植物、動物、禽類、昆蟲、人、溫泉或其他高溫環(huán)境中發(fā)現(xiàn) 200 種左右支原體。
細胞如果受到支原體污染,細胞生長速度變慢,細胞產(chǎn)生病變或形態(tài)改變。連續(xù)培養(yǎng)細胞污染的概率大約15~35%,主要來源于 20 多種支原體,包括口腔支原體 (M.orale)、肺炎支原體(M.pneumoniae)、發(fā)酵支原體(M.fermentans)、精氨酸支原體(M.arginini)、萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)和豬鼻支原體(M.hyorhinis)。
人員操作、污染的細胞、原輔料(血清、胰酶、培養(yǎng)基),實驗環(huán)境污染(生物安全柜、細胞間,培養(yǎng)箱)、實驗儀器(水浴鍋、液氮罐)、實驗耗材(培養(yǎng)皿、方瓶、細胞工廠)都可能是污染源。污染了的細胞一方面對生產(chǎn)帶來巨大影響,另外如果細胞產(chǎn)品、蛋白產(chǎn)品、病毒類產(chǎn)品受到支原體污染,最終會給患者帶來潛在的健康風(fēng)險。因此,監(jiān)管部門要求企業(yè)對細胞庫,檢定用細胞和產(chǎn)品進行支原體檢測,從源頭上進行控制,盡早發(fā)現(xiàn),確保放行產(chǎn)品不含支原體。對此,全球各國藥物監(jiān)管部門也發(fā)布了支原體檢測相關(guān)指南,檢測方法主要包括熒光染色法、培養(yǎng)法、生化檢測方法和核酸擴增法。
概述:
Rhinogen? Myco-AcidTM qPCR支原體檢測試劑盒利用Taqman 熒光探針原理,于定性檢測主細胞庫、工作細胞庫、病毒種子批以及臨床治療用細胞中是否有支原體污染。
試劑包裝:
Rhinogen? Myco-AcidTM qPCR支原體檢測試劑盒包裝規(guī)格如下:
試劑組分
貨號
規(guī)格
50 T
qPCR Master Mix
RA -MT05A
430μl
引物探針混合液
RA -MT05B
110μl
內(nèi)部質(zhì)控(IC )
RA -MT05C
600μl
陽性 質(zhì)控 (PC )
RA -MT05D
300μl
DNA稀釋液
RA -MT05E
300μl
保藏條件:
采用干冰運輸,收到產(chǎn)品后請立即置于-18℃及以下條件下儲存,有效期為12個月。
注:引物探針混合液(貨號:RA-MT05B)請于-18℃及以下避光存儲。
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