背景:
蛋白激酶是藥物發(fā)現(xiàn)中最重要的類別之一,它們在多種細(xì)胞事件的調(diào)節(jié)中起著至關(guān)重要的作用,已知至少有1200種蛋白激酶參與細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)。激酶既作為跨膜酶又作為胞質(zhì)酶存在,它們磷酸化絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸氨基酸殘基,基于這些底物特異性,激酶分為兩組,絲氨酸/蘇氨酸激酶和酪氨酸激酶。
激酶通過磷酸化其各自的下游特定底物蛋白來發(fā)揮其作用,它們催化ATP或GTP的γ-磷酸轉(zhuǎn)運(yùn)到底物蛋白中絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的羥基或脂質(zhì)中的糖基部分,并啟動一系列激活控制事件,包括細(xì)胞的生長、分化、分裂和腫瘤促進(jìn)。細(xì)胞中激酶缺乏受控活性被認(rèn)為是造成所有主要人類病理狀況的原因,例如癌癥、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病和代謝紊亂,因此它已在廣泛研究中被用作腫瘤治療的靶點(diǎn)。
概述:
Kinase-Turbo? 激酶活性檢測試劑盒是一種通過化學(xué)發(fā)光法測定激酶反應(yīng)后溶液中ATP的剩余量,從而進(jìn)行定量來檢測激酶活性的試劑盒。激酶在反應(yīng)過程中會催化ATP上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物的羥基上,從而使ATP轉(zhuǎn)變?yōu)锳DP,以此根據(jù)ATP的減少量來定量激酶的活性(如圖1)。本試劑盒借助ATP依賴的熒光素酶催化的熒光素發(fā)光反應(yīng),通過化學(xué)發(fā)光信號測定細(xì)胞內(nèi)ATP含量。這樣就可以通過設(shè)置ATP的標(biāo)準(zhǔn)曲線,來定量激酶反應(yīng)體系中的ATP量,從而計(jì)算ATP的減少量,最終計(jì)算出激酶的活性。激酶的活性與ATP剩余量成反比,即ATP剩余量越少,發(fā)光值越低,激酶活性就越高;若ATP剩余量越多,發(fā)光值就越高,激酶活性則越低。
Kinase-Turbo? 激酶活性檢測試劑盒(貨號:RA-GL13)可以適用最高濃度為10μM的ATP,且在0-10μM范圍內(nèi)線性呈現(xiàn)良好(如圖2);Kinase-Turbo? Plus激酶活性檢測試劑盒(貨號:RA-GL14)可以適用最高濃度為100μM的ATP,并在2 -100μM范圍內(nèi)線性呈現(xiàn)良好(如圖3);Kinase-Turbo? Max激酶活性檢測試劑盒(貨號:RA-GL15)可以適用最高濃度為500μM的ATP,在3-500μM范圍內(nèi)線性呈現(xiàn)良好(如圖4)。
應(yīng)用:
可用于檢測蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖等物質(zhì)的激酶活性,適用多種激酶和激酶底物組合檢測。
試劑包裝:
試劑名稱
貨號
規(guī)格
Kinase-Turbo? 激酶活性檢測試劑
RA-GL13-A
10ml
RA-GL13-B
10×10ml
Kinase-Turbo? Plus激酶活性檢測試劑
RA-GL14-A
10ml
RA-GL14-B
10×10ml
Kinase-Turbo? Max激酶活性檢測試劑
RA-GL15-A
10ml
RA-GL15-B
10×10ml
產(chǎn)品特性:
保存條件:
置于-70℃保存。試劑使用前請恢復(fù)至室溫,復(fù)溶后置室溫使用。為了保證產(chǎn)品穩(wěn)定性,復(fù)溶后的試劑請立即使用。避免試劑反復(fù)凍融。