背景:

   內切糖苷酶 F3（Endo F3）可在寡糖N-連接的二乙?；鶜ざ蔷厶呛诵闹械膬蓚€N-乙酰葡糖胺殘基之間進行切割，從而產生截短的糖分子，其中一個N-乙酰氨基葡萄糖殘基則保留在天冬酰胺上。Endo F3對寡甘露糖和雜合分子沒有活性。Endo F3可以較慢的速率切割非巖藻糖基化的雙角和三角復合寡糖，但僅限于肽連接的寡糖。雙角結構的核心巖藻糖基化可使其活性增加至400倍。核心巖藻糖基雙角結構是Endo F3的有效底物，即使在游離的低聚糖中也是如此。Endo F3還可在游離和蛋白質連接的寡糖上對巖藻糖基化的三甘露糖核心結構進行切割。復合四角聚糖的天然去糖基化需要通過順序水解為三甘氨酸二乙?；鶜ざ牵∕an3GlcNAc2）核心，然后再使用Endo F3進行切割。

   Rhinogen^? Endo F3重組表達于E. coli，N端帶MBP融合蛋白，C端帶6×His標簽。Rhinogen^? Endo F3 切割游離的或天冬酰胺連接的三觸角或 α-(1-6) 巖藻糖基化的雙觸角寡糖，以及三氨糖基殼二糖核心結構。非巖藻糖基化的雙觸角聚糖也會被切割，但速度會降低 40 倍。它在寡糖的二乙酰殼二糖核心中的兩個 N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解，產生一個截短的糖分子，其中一個 N-乙酰氨基葡糖殘基留在天冬酰胺上。相反，PNGaseF 可完整去除寡糖。α1-3 巖藻糖基化會抑制酶活性，且對寡甘露糖和雜合分子沒有活性。

產品規(guī)格：

   Rhinogen^? 內切糖苷酶 F3（Endo F3）包裝規(guī)格如下：

配套試劑：

   Rhinogen^? 內切糖苷酶 F3（Endo F3）配套提供的試劑如下：

   Endo F3重組表達于E. coli，理論分子量約74 kDa，N端帶MBP融合蛋白，C端帶6×His標簽。

產品質量:

   1. 高純度：通過SDS-PAGE檢測，純度≥90％；

   2. 高活性：活性＞5U/ml；

酶活定義:

   在 37?C、pH 4.5 條件下，在 1 分鐘內催化 1 μM豬纖維蛋白原釋放 N-連接寡糖所需的酶量。

應用:

   1. 糖組學；

   2. 糖型分析及糖基化位點的確定；

   3. 蛋白質組學；

保存條件：

   采用冰袋運輸，2-8℃可儲存12個月。避免反復凍融。

使用注意事項：

   1. 對于不同的糖蛋白樣品，需要實驗摸索最適的酶濃度及反應時間。

   2. 反應體系可以線性擴大。

   3. 為防止微生物污染，盡可能無菌取用。

   4. 較高的酶濃度可以提高單個糖蛋白的消化效率，需要根據實際情況優(yōu)化。

   5. 適當分裝以減少多次凍融帶來的活性損失。

   6. 本產品僅供研究使用，不適用于人或動的物診斷及治療用途。