精品国产亚洲AV麻豆映画_日韩高清伦理片中字在线观看_大地资源在线看视频_97真人无码视频_亚洲av无码国产精品色软件_无码一区二区三区免费_天天躁夜夜躁狠狠躁婷婷_日韩免费精品视频完整播放_麻豆秘 欧美在线欧美在线观看_国产av一级黄片

您現(xiàn)在的位置:首頁(yè)產(chǎn)品 全能核酸酶 NuclecutTM 全能核酸酶
NuclecutTM 全能核酸酶
  1. 貨號(hào)
  2. 規(guī)格
  3. 價(jià)格
RA-NC01-A
10KU
詢價(jià)
RA-NC01-B
50KU
詢價(jià)
RA-NC01-C
500KU
詢價(jià)

產(chǎn)品概述

背景:  

       在生物制品的制備/生產(chǎn)過(guò)程中,去除DNA殘留是極為重要的。在過(guò)去幾年里,重組蛋白類生物藥物的發(fā)展突飛猛進(jìn),并且在未來(lái)依然前景廣闊。在微生物系統(tǒng)中,這些重組蛋白一般都是通過(guò)微生物的發(fā)酵,并且通過(guò)裂解微生物細(xì)胞而釋放出來(lái)。然而,在釋放出目標(biāo)產(chǎn)物的同時(shí),細(xì)胞裂解物會(huì)同時(shí)產(chǎn)生一些雜產(chǎn)物,比如宿主細(xì)胞蛋白、核酸(DNA以及RNA)、細(xì)胞內(nèi)毒素以及一些其他宿主細(xì)胞雜質(zhì)。重組蛋白藥物中的DNA殘留可能會(huì)給患者體內(nèi)帶入激活的致癌基因,或者作為潛在的感染病毒DNA致使患者被感染。因此,DNA殘留量是重組蛋白藥物的一個(gè)重要的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。世界上許多權(quán)威機(jī)構(gòu)都對(duì)重組蛋白類藥物中的宿主DNA殘留量做出了嚴(yán)格的規(guī)定,對(duì)于每支疫苗中的DNA殘留量,WHO規(guī)定不可以超過(guò)l0ng,美國(guó)FDA規(guī)定不可以超過(guò)l0pg,我國(guó)規(guī)定為l00pg以下。 

       NuclecutTM 全能核酸酶(SuperNuclease),是一種核酸內(nèi)切酶,可將核酸降解成2~5個(gè)堿基的5'-單磷酸核苷酸,因其能高效降解任何形式(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀)的DNA和RNA而沒(méi)有蛋白裂解活性,因此被稱為“全能核酸酶”。全能核酸酶能有效降低蛋白樣品粘度,去除蛋白樣品中核酸的污染,且無(wú)蛋白酶活性殘留,NuclecutTM 全能核酸酶活性達(dá)1×106U/mg蛋白。全能核酸酶在降低粘性的同時(shí),也具有多種其他用途,如:減少了樣品處理時(shí)間、增加了蛋白產(chǎn)量、離心時(shí)沉淀和上清分離的更徹底、更便于溶液的離心(尤其是超濾)、提高色譜純化的效率等。

概述:

       該酶在0~42℃的均有活性,最適溫度為37℃;有效的pH范圍為6.0-10.0,最適pH為8.0;發(fā)揮活性需要Mg2+存在,1-2mM為最佳;在去污劑、SDS、尿素等存在下仍然保持一定活性。全能核酸酶可以非特異性裂解單鏈以及雙鏈的DNA和RNA,并切割出一個(gè)3'-OH和5'-磷酸基。

產(chǎn)品包裝:

       NuclecutTM 全能核酸酶(SuperNuclease)包裝規(guī)格如下:

目錄號(hào) 規(guī)格
RA-NC01-A
10KU
RA-NC01-B
50KU
RA-NC01-C
500KU

       產(chǎn)品儲(chǔ)存于20mM Tris-HCI,pH8.0,2mM MgCl2,20mM NaCl和50%(v/v)甘油中,不添加防腐劑。

產(chǎn)品來(lái)源

       NuclecutTM 全能核酸酶序列來(lái)源于Serratia marcescens,重組表達(dá)于E. coli,單體理論分子量約27.5KD,C端帶6×His標(biāo)簽。

產(chǎn)品特性

       NuclecutTM 全能核酸酶可非特異性降解所有形式的DNA和RNA(單鏈的、雙鏈的、線性的和環(huán)化的),將核酸完全消化為長(zhǎng)度為3至5個(gè)堿基的5'-單磷酸末端寡核苷酸。

產(chǎn)品質(zhì)量

       1. 高純度:通過(guò)SDS-PAGE檢測(cè),純度≥90%;

       2. 高穩(wěn)定性:每批產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品批間穩(wěn)定性。

       3. 無(wú)蛋白酶活性:偶氮酪蛋白法分析無(wú)蛋白酶活性。

      

儲(chǔ)存條件:

       采用干冰運(yùn)輸,收到產(chǎn)品后請(qǐng)立即將其置于-20℃保存。復(fù)溶后可適當(dāng)分裝以減少多次凍融帶來(lái)的活性損失。

應(yīng)用:

       1. 從蛋白質(zhì)和其他生物制劑中去除DNA / RNA;

       2. 降低由核酸引起的粘度;

       3. 在二維凝膠電泳和色譜中制備樣品;

       4. 防止細(xì)胞結(jié)塊;

       5. 降低哺乳動(dòng)物細(xì)胞提取物的粘度;

       6. 降低大腸桿菌細(xì)胞裂解液的粘度以增強(qiáng)過(guò)濾性。

相關(guān)下載

常見(jiàn)問(wèn)題

什么樣的質(zhì)量/數(shù)量的酶對(duì)特定的應(yīng)用是足夠的? 
有幾個(gè)參數(shù)如溫度及酶切體系會(huì)影響酶的活性,因此最佳條件將因工藝而異,需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,需要在哪一步加入全能核酸酶?如果在低溫下進(jìn)行酶切,需要添加多少全能核酸酶?
這取決于使用全能核酸酶的目的,但一般情況下,酶的添加最好是在培養(yǎng)后和捕獲步驟之前。
在溫度低于37℃時(shí),酶的效率降低,補(bǔ)償這種效率下降所需的量因過(guò)程而異,并取決于現(xiàn)有的其他參數(shù)。通常,增加另一個(gè)參數(shù),如孵育時(shí)間,可以在不需要增加酶用量的情況下進(jìn)行補(bǔ)償。

為什么全能核酸酶作用后沒(méi)效果?什么會(huì)抑制其活性?
全能核酸酶活性范圍較廣,而1-2mM Mg2+的濃度對(duì)全能核酸酶的活性至關(guān)重要。
Mn2+可以替代Mg2+;在Mg2+的存在下,酶活性達(dá)到最佳。一價(jià)陽(yáng)離子濃度>300mM,磷酸鹽濃度>100mM,以及硫酸銨濃度>100 mM都會(huì)抑制約50%的活性。此外,>1mM EDTA濃度也會(huì)抑制全能核酸酶的活性。

酶活降低的原因是什么?
全能核酸酶通常非常穩(wěn)定,然而在極少數(shù)情況下,會(huì)導(dǎo)致活性喪失??赡茉蛴校?/span>
1)不可逆失活可能是由于樣品中存在變性劑,如蛋白酶;或者是存儲(chǔ)不當(dāng)。
2)可逆失活通常是由于螯合劑的存在,如EDTA,它可以螯合去除活性必需的鎂離子。
* 姓名:
* 公司:
* 電話:
* 郵箱:
* 貨號(hào):
* 留言: