背景：

       促甲狀腺激素受體（Thyroid-stimulating hormone receptor, TSHR）主要存在甲狀腺濾泡細(xì)胞膜上，在人體生理及病理情況下都發(fā)揮著重要作用。TSHR為促甲狀腺激素（Thyroid-stimulating hormone, TSH）的特異性受體，是一種G蛋白偶聯(lián)受體，TSH通過與細(xì)胞表面的TSHR結(jié)合，觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)cAMP的產(chǎn)生，作為第二信使的cAMP通過識別其位于基因啟動子區(qū)的特異性反應(yīng)元件CRE（cAMP response elements）對下游基因進(jìn)行調(diào)控。TSHR表達(dá)細(xì)胞株是TSH及TSHR相關(guān)研究的有效手段，該方法需對細(xì)胞中產(chǎn)生的cAMP進(jìn)行定量，需要昂貴的試劑盒和繁瑣的ELISA檢測步驟^[1]。

圖1. TSHR信號通路^[2]

       Rhinogen^? TSHR Reporter Bioassay是一種生物發(fā)光報告基因檢測方法，其作用機理（圖2）基于TSHR反應(yīng)的主要信號通路cAMP/PKA信號途徑。本系統(tǒng)采用工程改造的中國倉鼠卵巢細(xì)胞（Chinese hamster ovary cells，CHO cells）作為測活細(xì)胞，該細(xì)胞株穩(wěn)定表達(dá)TSHR以及由CRE反應(yīng)元件驅(qū)動表達(dá)的螢火蟲熒光素酶。在該細(xì)胞中，TSHR的激活觸發(fā)cAMP的產(chǎn)生，cAMP則激活熒光素酶基因的表達(dá)，而熒光素酶的活性通過生物發(fā)光進(jìn)行定量。

圖2.Rhinogen^? TSHR Reporter Bioassay原理圖

產(chǎn)品規(guī)格：

       Rhinogen^? TSHR報告基因檢測系統(tǒng)提供的TSHR相關(guān)生物學(xué)活性檢測方法操作具有操作簡便（圖3）、變異性低、量效關(guān)系良好、靈敏度高等特點。

       1. 原理明確：基于TSHR反應(yīng)的主要信號通路cAMP/PKA信號途徑；

       2. 應(yīng)用廣泛：可用于TSH的微量測定、TSHR拮抗劑的高通量篩選、TSH和TSHR作用機理研究；

       3. 通 量 高：可在96孔、384孔培養(yǎng)板中進(jìn)行測定；

       4. 快速易用：檢測過程簡單，檢測試劑易用；

       5. 信噪比高：信號/背景的比率高。

       Rhinogen^? TSHR報告基因檢測系統(tǒng)的各項特性使得其可作為針對TSH和TSHR相關(guān)研究、TSHR藥物篩選及檢測的有效手段。同時，該法可作為針對TSHR藥物的生物學(xué)活性常規(guī)檢測方法及批簽發(fā)檢測指標(biāo)。

圖3. Rhinogen^?TSHR Reporter Bioassay檢測流程圖

運輸及存儲：

       運輸方式：干冰運輸

       儲       存：收到細(xì)胞后，請立即將TSHR報告基因測活細(xì)胞凍存管轉(zhuǎn)移至-140°C以下的保存條件長期保存。

參考文獻(xiàn)：

       [1] 王少艷, 馮憑, 方佩華. 人促甲狀腺激素受體的表達(dá)及其抗體的檢測. 國際內(nèi)分泌代謝雜志　Intern J Endocrinol Metab, 2006, 26(3): 178-180

       [2] Tetsuo Kondo, Shereen Ezzat and Sylvia L. Asa. Pathogenetic mechanisms in thyroid follicular-cell neoplasia. NATURE REVIEWS CANCER. 2006, 6: 292-306。