背景:
羧肽酶B又稱為肽酰-L-賴氨酸(L-精氨酸)水解酶,屬于金屬羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,每分子含有一個Zn原子,可選擇性水解蛋白或多肽羧基端的精氨酸和賴氨酸。活性受精氨酸、賴氨酸的競爭性抑制,金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。
Rhinogen? Carboxypeptidase B與大鼠胰腺羧肽酶B氨基酸序列完全一致,經(jīng)過大腸桿菌系統(tǒng)重組表達(dá)生產(chǎn)并經(jīng)過層析純化得到的重組羧肽酶B。分子量為33.8kD,等電點(diǎn)為6.0,最適pH為7.0-9.0。在25℃-37℃范圍下具有較好的酶切活性,在低溫下適當(dāng)延長反應(yīng)時間也可以進(jìn)行消化。
產(chǎn)品來源:
Rhinogen? Carboxypeptidase B是利用重組E. coli表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)來源于大鼠胰腺的重組羧肽酶B,經(jīng)過層析純化得到的重組羧肽酶B,分子量大小約為33.8kDa。
包裝規(guī)格:
Rhinogen? Carboxypeptidase B 包裝規(guī)格如下:
QIP-006是以凍干粉形式提供。
目錄號
規(guī)格
QIP-006-A
1mg
QIP-006-B
5×1mg
產(chǎn)品質(zhì)量:
純度:SDS-PAGE單一主條帶,HPLC≥95%。
產(chǎn)品特性:
最適pH為7.0-9.0。
儲存條件:
1. 凍干粉采用冰袋運(yùn)輸, 收到產(chǎn)品后請立即將其置于-20℃儲存,24個月穩(wěn)定;
2. 使用前用無菌水或者10mM Tris-HCl (pH7.5)溶解Carboxypeptidase B凍干粉末,使酶液濃度為1-10mg/ml。溶解后,-20℃存放,避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品特點(diǎn):
Rhinogen? Carboxypeptidase B是一種高度純化和非常穩(wěn)定的重組蛋白酶,具有穩(wěn)定性高、比活性高等特點(diǎn)。適用于蛋白質(zhì)C端j堿性氨基酸測定和抗體堿性峰的檢測。
1. 高純度:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求,純度≥95%;
2. 無動物源性:重組生產(chǎn),無外源性的病毒污染,生產(chǎn)過程不使用任何動物源原料;
3. 高穩(wěn)定性:每批產(chǎn)品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品批間穩(wěn)定性;
4. 凍干粉:易于儲存和運(yùn)輸;
應(yīng) 用:
1.蛋白質(zhì)C-末端堿性氨基酸如精氨酸、賴氨酸和組氨酸的測定;
2.重組胰島素及其類似物的生產(chǎn);
3.重組抗體的質(zhì)量檢測;
4.其它重組多肽類物質(zhì)的生產(chǎn);
5.某些特殊化合物的酶促合成。
使用建議:
1、試劑準(zhǔn)備:
1)使用前,請將Rhinogen? Carboxypeptidase B取出,10000rpm離心10秒,確保所有干粉都在管底;用去離子水或者10mM Tris-HCl (pH7.5)溶解凍干粉末,使酶液濃度為1-10mg/ml。
2、推薦使用方法:
2、Carboxypeptidase B蛋白的推薦使用量為,酶量:目的蛋白(質(zhì)量比)=1:50~1:1000(w/w),最適pH為7.5-9.0,25℃-37℃酶切。
注意:
1)對于不同的蛋白樣品,需要實(shí)驗(yàn)摸索最適的酶濃度及反應(yīng)時間。
2)25℃-37℃反應(yīng),使用25℃消化時可以適當(dāng)延長反應(yīng)時間。
3)最適的酶切反應(yīng)緩沖液pH為7.5-9.0,pH≥12時,活性則完全喪失。
操作說明:
本產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人或動物的診斷及治療用途。